مقارنة بين الإرشادات الجديدة والقديمة لاختبار السمية الحادة على ديدان الأرض
آخر تحديث في
لتعزيز الصرامة العلمية لتقييم السلامة البيئية لمبيدات الآفات، صدر رسمياً المعيار الوطني GB/T 31270.15-2025 «إرشادات اختبار تقييم السلامة البيئية لمبيدات الآفات الكيميائية — الجزء 15: اختبار السمية الحادة على ديدان الأرض»، ودخل حيز التنفيذ في 1 مايو 2026، ليحل محل إصدار 2014 السابق.
تحسّن هذه المراجعة ظروف الاختبار والكواشف والمواد ومعالجة البيانات وضبط الجودة بصورة شاملة. ويلغي الإصدار الجديد الشرط الصارم للرطوبة الجوية أثناء الاختبار، مما يزيد المرونة. كما يضيف قسماً للمراجع المعيارية ويحسّن قائمة الكواشف والمعدات.
تنبيه من REACH24H
يتعين على الشركات التي تجري أو تعتزم إجراء اختبارات السمية الحادة على ديدان الأرض لأغراض تسجيل مبيدات الآفات في الصين الالتزام الآن بالمعيار GB/T 31270.15-2025، الذي دخل حيز التنفيذ في 1 مايو 2026. وقد لا تُقبل البيانات الناتجة وفق منهجية إصدار 2014 القديم في الطلبات التنظيمية الجديدة.
1. النطاق والمراجع المعيارية والتعريفات
يدخل إصدار 2025 تغييرات هيكلية أساسية على المعيار، تشمل توسيع نطاق التطبيق وإضافة مراجع معيارية وتبسيط تعريفات المصطلحات. وترسي هذه التغييرات إطاراً أشد متانة وشفافية لإجراءات الاختبار بأكملها.
1.1 النطاق
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): لا ينطبق على مبيدات الآفات الكيميائية المتطايرة وضعيفة الذوبان.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): لا ينطبق على مبيدات الآفات المتطايرة. أُلغي قيد «ضعيفة الذوبان»، مما يوسع نطاق المواد القابلة للاختبار.
1.2 المراجع المعيارية
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): لا توجد.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): أُضيف الفصل 2 خصيصاً للمراجع المعيارية، مع الاستشهاد بمعايير داعمة رئيسية تشمل GB/T 6682 (المياه للاستخدام في المختبرات التحليلية)، وNY/T 52 (تحليل التربة)، وNY/T 1121.2 (قياس pH التربة)، وNY/T 4195.8 (تربية الكائنات الحية المستخدمة في الاختبار).
1.3 المصطلحات والتعريفات
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): تضمن تعريفات السرج ودودة الأرض البالغة والتركيز المميت الوسطي ومادة الاختبار ومبيد الآفات الكيميائي.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): حُذفت تعريفات السرج ودودة الأرض البالغة ومادة الاختبار ومبيد الآفات الكيميائي. ولم يبقَ إلا المصطلح الأساسي: التركيز المميت الوسطي (LC50).
2. ظروف الاختبار ومواده
يوسع إصدار 2025 بصورة ملحوظة مواصفات المواد والمعدات اللازمة للاختبار، ويقدم للمختبرات إرشادات تشغيلية أوضح مع إزالة القيود غير الضرورية.
2.1 ظروف الاختبار
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): درجة الحرارة: 20°C ± 2°C؛ الرطوبة النسبية للهواء: من 70% إلى 90%؛ شدة الإضاءة: من 400 lx إلى 800 lx.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): أُلغي شرط الرطوبة الجوية أثناء الاختبار لزيادة المرونة التشغيلية. وتبقى درجة الحرارة 20°C ± 2°C وشدة الإضاءة من 400 lx إلى 800 lx.
2.2 الكواشف
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): لا توجد.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): أُضيفت قائمة مفصلة للكواشف تشمل الأسيتون وn-hexane ورمل الكوارتز وطين الكاولين وكربونات الكالسيوم والكلوروأسيتاميد وغيرها، مع توجيهات واضحة بشأن المواد الكيميائية والمواد اللازمة.
2.3 كائن الاختبار
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): أوصى باختيار أفراد بالغة من ديدان الأرض من نوع Eisenia fetida للاختبار، بوزن جسم يتراوح بين 0.30 g و0.60 g.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): ينص على استخدام ديدان الأرض من نوع Eisenia fetida. ويجب استخدام ديدان بالغة سليمة يزيد عمرها على 2 من الأشهر، ذات سرج متطور (ناضجة جنسياً)، ووزن جسم بين 300 mg و600 mg. ويجب أن تتوافق تربية ديدان الأرض من نوع Eisenia fetida مع NY/T 4195.8 لتوحيد ظروف التربية.
2.4 الأجهزة والمعدات
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): اقتصر على الأجهزة الرئيسية: حاضنة وأوعية زجاجية ودوارق حجمية.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): يقدم قائمة شاملة للمعدات مع مواصفات الدقة: أطباق تبلور أو كؤوس مختبرية، وحجرات بيئية أو غرف ثابتة الحرارة، ومعدات خلط أو مزج، وموازين إلكترونية (دقة القراءة: 0.01 g و0.001 g و0.0001 g)، وموازين (دقة القراءة: 0.1 g)، ومقياس حرارة ورطوبة أو مسجلات لهما، ومقياس pH، وفرن، ومقياس شدة الإضاءة.
2.5 مادة الاختبار
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): ينبغي أن تكون مادة الاختبار مستحضرات مبيدات الآفات أو مواد تقنية أو مواد نقية. وللمواد ضعيفة الذوبان في الماء، كان يمكن استخدام كمية صغيرة من مذيب عضوي منخفض السمية لديدان الأرض كمذيب مساعد، بكمية لا تتجاوز عموماً 0.1 mL(g)/L.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): يجب أن تكون مادة الاختبار مواد تقنية (مركزات تقنية) أو مستحضرات أو مواد نقية. وقبل الاختبار ينبغي الحصول على معلومات عن ذوبانها في الماء والمذيبات العضوية، وثباتها في الماء والتربة، وثباتها تجاه التحلل الضوئي، وضغط بخارها المشبع، ونقاوتها، ومعامل توزيعها بين n-octanol/الماء، ونتائج اختبار قابليتها للتحلل الحيوي بسهولة. ويعكس ذلك اهتماماً أكبر بكثير بتوصيف المادة قبل الاختبار.
3. إجراءات الاختبار
شهدت إجراءات الاختبار أكبر التعديلات في معيار 2025. وتشمل التغييرات الرئيسية اختبار تحديد المدى والاختبار الحدي وكل جوانب الاختبار الرئيسي تقريباً، من تحديد التركيز والمكررات إلى تحضير التربة والتعامل مع الكائنات وبروتوكولات الملاحظة.
3.1 اختبار تحديد المدى
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): في الظروف نفسها للاختبار الرئيسي، تُحدد عدة مجموعات تركيز بفواصل واسعة لتعيين أدنى تركيز يسبب نفوق 100% وأعلى تركيز يسبب نفوق 0% من ديدان الأرض. وتُحدد تراكيز الاختبار الرئيسي ضمن هذا المدى.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): تُحدد مجموعات المعالجة بمتتالية هندسية. ويُجرى اختبار تحديد المدى في الظروف نفسها للاختبار الرئيسي لتحديد مجال تراكيزه. ولا يتطلب اختبار تحديد المدى مكررات، مما يبسط المرحلة الأولية.
3.2 الاختبار الحدي
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): يُحدد التركيز الحدي الأعلى عند 100 mg a.i./kg من التربة الجافة (a.i. تعني المادة الفعالة). وإذا لم يُلاحظ نفوق ديدان الأرض فلا يلزم إجراء اختبارات إضافية.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): يُحدد التركيز الحدي الأعلى عند 1,000 mg (ألف) من مادة الاختبار/kg من التربة الجافة. وإذا لم يتجاوز معدل نفوق ديدان الأرض 10% فلا يلزم الاختبار الرئيسي. وتقلل العتبة الأعلى الاختبارات غير الضرورية للمواد منخفضة السمية.
3.3 الاختبار الرئيسي — تحديد التركيز والمكررات
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): تُحدد 5 إلى 7 مجموعات تركيز ضمن المدى الذي حدده اختبار تحديد المدى، مع مجموعة ضابطة غير معالجة. وعند استخدام مذيب عضوي تُضاف مجموعة ضابطة للمذيب. وتُستخدم 3 مكررات لكل مجموعة تركيز.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): استناداً إلى نتائج تحديد المدى أو بيانات السمية المعروفة، تُحدد 5 إلى 7 تراكيز معالجة بمتتالية هندسية، مع مجموعة ضابطة غير معالجة ومجموعة ضابطة للمذيب عند الاقتضاء. ويجب أن تضم كل مجموعة 4 مكررات (بدلاً من 3)، وفي كل مكرر 10 ديدان أرض.
3.4 الاختبار الرئيسي — تحضير كائنات الاختبار
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): لا يوجد (لم يُحدد إجراء تحضير بعينه).
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): قبل الاختبار تُحفظ ديدان الاختبار في تربة اصطناعية لمدة 24 ساعة في الظروف نفسها للاختبار الرئيسي. وتُغسل الديدان جيداً وتُجفف بالتربيت بورق ترشيح قبل وزنها. وتُحسن خطوة التأقلم هذه اتساق الاختبار.
3.5 الاختبار الرئيسي — طريقة إضافة مادة الاختبار
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): توضع 500 g من التربة في وعاء زجاجي (عمق التربة ≥ 8 cm). ويُضاف محلول مادة الاختبار ويُمزج جيداً. وعند استخدام مذيب عضوي يجب تبخيره بالكامل. وتُضبط رطوبة التربة عند 30%–35% من وزن التربة الجافة. وللمواد ضعيفة الذوبان في الماء كان يمكن استخدام كمية صغيرة من مذيب عضوي (≤ 0.1 mL(g)/L).
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): يحدد 3 طرق مختلفة للإضافة وفقاً للذوبان:
(1) بالنسبة إلى مواد الاختبار القابلة للذوبان في الماء: يُحضّر محلول الاختبار بالماء ويُمزج جيداً بالتربة الاصطناعية.
(2) بالنسبة إلى المواد القابلة للذوبان في المذيبات العضوية: تُذاب في n-hexane أو الأسيتون، وتُضاف قطرة قطرة إلى 10 g من رمل الكوارتز. وبعد تبخر المذيب بالكامل، تُمزج بالتربة الاصطناعية المرطبة مسبقاً، ويُضاف ماء منزوع الأيونات للوصول إلى وزن رطب قدره 750 g.
(3) بالنسبة إلى المواد غير القابلة للذوبان في الماء ولا في المذيبات العضوية:تُمزج برمل الكوارتز حتى يبلغ المجموع 10 g، ثم بالتربة الاصطناعية المرطبة مسبقاً، ويُضاف ماء منزوع الأيونات حتى يبلغ الوزن الرطب 750 g.
3.6 الاختبار الرئيسي — وزن التربة الاصطناعية
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): توضع 500 g من التربة في وعاء زجاجي (عمق التربة ≥ 8 cm).
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): تُضاف تربة اصطناعية معالجة بوزن رطب 750 g إلى وعاء زجاجي، بعمق لا يقل عن 8 cm. ويحل تحديد «الوزن الرطب» محل القياس السابق القائم على الوزن الجاف.
3.7 الاختبار الرئيسي — وزن جسم ديدان الأرض
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): تُوزن مرة واحدة عند بدء الاختبار، بوزن جسم بين 0.30 g و0.60 g.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): تُوزن مرتين: عند بدء الاختبار (بوزن جسم بين 0.30 g و0.60 g)، وعند انتهاء الاختبار للديدان الباقية على قيد الحياة.
3.8 الاختبار الرئيسي — محتوى رطوبة التربة
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): يُضاف ماء منزوع الأيونات لضبط رطوبة التربة عند 30%–35% من وزن التربة الجافة.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): عند الحاجة يُضاف الماء لضبط رطوبة التربة عند نحو 35% من وزن التربة الجافة. ويجب قياس محتوى رطوبة التربة وفق NY/T 52، لتوحيد طريقة القياس.
3.9 الاختبار الرئيسي — الحضانة والملاحظة
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): يستمر الاختبار أسبوعين. في اليوم 7 واليوم 14 تُفرغ التربة وتُلاحظ وتُسجل أعراض التسمم والديدان النافقة (تُلمس النهاية الخلفية بإبرة؛ عدم الاستجابة يعني النفوق)، وتُزال الديدان النافقة فوراً. ويُحسب LC50 وحدود الثقة 95% استناداً إلى معدلات النفوق في اليوم 7 واليوم 14.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): تبقى مدة الاختبار 14 يوماً. وتشمل التحسينات الرئيسية:
- إضاءة مستمرة لضمان بقاء الديدان في التربة الاصطناعية.
- تعويض الماء دورياً بالاعتماد على الوزن للحفاظ على رطوبة التربة.
- طريقة الملاحظة: تُفرغ التربة برفق على طبق زجاجي أو صفيحة، وتُلتقط الديدان لفحصها.
- معيار النفوق: تُعد ديدان الأرض نافقة عندما لا تستجيب النهاية الأمامية للمثير الميكانيكي (بدلاً من النهاية الخلفية).
- بعد فحص اليوم 7، تُعاد الديدان الباقية على قيد الحياة والتربة الاصطناعية إلى الوعاء لمتابعة الاختبار.
- عند انتهاء الاختبار، تُوزن ديدان الأرض الباقية على قيد الحياة ويُقاس محتوى الرطوبة في التربة الاصطناعية.
4. الأساليب الإحصائية وضبط الجودة
يحدّث إصدار 2025 إطار التحليل الإحصائي ويشدد متطلبات ضبط الجودة لضمان نتائج اختبار أكثر موثوقية وقابلية للتكرار.
4.1 الأساليب الإحصائية
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): يمكن حساب LC50 وحدود الثقة 95% لكل وقت ملاحظة بطريقة Spearman-Kärber أو الاستيفاء الخطي أو الطريقة البيانية لتحليل probit. ويمكن أيضاً استخدام برامج مناسبة لحساب بيانات السمية.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): تُختار أساليب إحصائية مثل probit أو الانحدار اللوجستي لحساب LC50 وفاصل الثقة 95% له (باستثناء الاختبار الحدي). ويمكن استخدام برامج إحصائية مناسبة. وعندما تكون معدلات النفوق 0% و100% عند تركيزين متتاليين بنسبة هندسية ≤ 2.0، يُستخدم متوسطهما الهندسي بوصفه LC50. ويوفر ذلك توجيهاً إحصائياً أوضح ويزيل غموض الحالات الحدية.
4.2 ضبط الجودة
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): يجب ألا يتجاوز النفوق في المجموعة الضابطة غير المعالجة 10%.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): يجب ألا يتجاوز النفوق في المجموعة الضابطة غير المعالجة والمجموعة الضابطة للمذيب 10%. ويضمن إدراج المجموعة الضابطة للمذيب صراحة ضمن معايير ضبط الجودة مراقبة الآثار المرتبطة بالمذيب بصورة مناسبة.
5. التقارير والملاحق
يعزز معيار 2025 متطلبات التقارير بصورة ملحوظة ويُدخل تغييرات بارزة على الملاحق، منها حذف إطار تصنيف السمية.
5.1 تقرير الاختبار
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): متطلبات أساسية للتقارير.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): أصبحت محتويات التقرير أكثر تفصيلاً وتوحيداً، وتشمل ظروف الاختبار والبيانات الخام والأساليب الإحصائية ومؤشرات جودة إضافية. ويتماشى ذلك مع ممارسات GLP الدولية ويعزز شفافية البيانات.
5.2 تحضير التربة الاصطناعية
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): حدد الملحق A مكونات التربة الاصطناعية ونسبها.
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): أُضيفت طريقة تحضير التربة الاصطناعية إلى المكونات والنسب، لتوفير بروتوكول كامل متدرج يضمن اتساق تحضير التربة بين المختبرات.
5.3 تصنيف السمية
الإصدار القديم (GB/T 31270.15-2014): حدد الملحق B أربعة مستويات للسمية استناداً إلى LC50 (14d) / (mg a.i./kg من التربة الجافة):
شديدة السمية جداً: LC50 ≤ 0.1
عالية السمية: 0.1 < LC50 ≤ 1.0
متوسطة السمية: 1.0 < LC50 ≤ 10
قليلة السمية: LC50 > 10
الإصدار الجديد (GB/T 31270.15-2025): حُذف ملحق تصنيف السمية.
6. الخلاصة والتوصيات
يمثل الانتقال من GB/T 31270.15-2014 إلى GB/T 31270.15-2025 تحديثاً شاملاً لإطار اختبار السمية الحادة على ديدان الأرض. وتشمل التحسينات الرئيسية توسيع المراجع المعيارية، وزيادة تفصيل مواصفات الكواشف والمعدات، وتحسين الإجراءات مع تعدد طرق إضافة المادة، وتعزيز الصرامة الإحصائية ومعايير ضبط الجودة.
ينبغي للشركات التي تجري أو تكلف بإجراء اختبارات السمية الحادة على ديدان الأرض لأغراض تسجيل مبيدات الآفات في الصين إعطاء الأولوية للإجراءات التالية:
تحديث بروتوكولات الاختبار — مراجعة SOPs لتعكس طرق الإضافة الجديدة ووزن التربة (750 g وزناً رطباً) ومتطلبات التكرار (4 لكل مجموعة) وإجراءات الملاحظة.
تحديث المعدات — التأكد من استيفاء الموازين متطلبات دقة القراءة المحددة (0.01 g و0.001 g و0.0001 g)، واقتناء معدات إضافية مثل مقياس شدة الإضاءة ومقياس pH إذا لم تكن متاحة.
اعتماد الأساليب الإحصائية الجديدة — تطبيق تحليل probit أو الانحدار اللوجستي بدلاً من نهج Spearman-Kärber القديم، والاستعداد لحساب المتوسط الهندسي لأنماط النفوق المحددة.
تعزيز توثيق التقارير — مواءمة تقارير الاختبار مع متطلبات التقارير الجديدة الأشمل، بما يشمل البيانات الخام وظروف الاختبار والأساليب الإحصائية.
هل تحتاج إلى مساعدة للانتقال إلى المعيار GB/T 31270.15-2025؟
بعد انقضاء تاريخ السريان في 1 مايو 2026، ينبغي للمختبرات ومسجلي مبيدات الآفات الذين لم يكملوا انتقالهم المنهجي أن يفعلوا ذلك بأسرع وقت. ويمكن لفريق امتثال الكيماويات الزراعية لدى REACH24H المساعدة في مراجعة بروتوكولات الاختبار وتقييم تأهيل المختبرات ودعم الطلبات التنظيمية لضمان الامتثال للمعيار الجديد.
أرسل استفسارك بشأن الامتثال اطلع على خدمة مبيدات الآفات في الصين
كتبه
REACH24H Agrochemical Compliance Team
REACH24H
يقدم فريق الكيماويات الزراعية في REACH24H خدمات متكاملة للامتثال التنظيمي العالمي لشركات مبيدات الآفات والمبيدات الحيوية ومنتجات الإبادة الحيوية والمحفزات الحيوية والأسمدة. وتغطي خدماتنا أسواق الصين والولايات المتحدة وأوروبا وآسيا والمحيط الهادئ وأمريكا اللاتينية. وقد قدمنا خدمات لأكثر من 600 شركة عالمياً، مع تغطية تتجاوز 90% من أكبر 100 شركة صينية لمبيدات الآفات.