Studi tossicologici per i dossier GRAS della FDA: requisiti dei dati e selezione degli standard di prova

Principi generali del rapporto tossicologico

• Completezza e rilevanza:

  Il rapporto dovrebbe fornire una revisione completa di tutti i dati tossicologici disponibili pertinenti alla sostanza notificata, comprese le informazioni sulla tossicità della sostanza stessa, dei suoi analoghi strutturali e dei suoi principali metaboliti. I dati presentati devono essere direttamente pertinenti alle condizioni d’uso previste, alle vie di esposizione attese e alle popolazioni target di interesse.

• Rigore scientifico e chiara giustificazione:

  Tutti gli studi citati dovrebbero provenire da letteratura scientifica affidabile e sottoposta a revisione paritaria oppure da rapporti sperimentali condotti in conformità agli standard di Buona Pratica di Laboratorio (GLP). I dati dovrebbero essere riproducibili e interpretabili. I dati tossicologici non dovrebbero essere semplicemente elencati; devono invece essere sottoposti ad analisi sistematica e valutazione critica, fino a giungere a una conclusione sulla sicurezza chiara e adeguatamente supportata.

• Trasparenza e tracciabilità:

  Tutte le fonti dei dati, comprese le citazioni bibliografiche, i numeri dei rapporti di studio e gli eventuali dati proprietari non pubblicati, dovrebbero essere documentati integralmente per garantire la trasparenza e la tracciabilità delle informazioni presentate, consentendo ai revisori normativi di effettuare una verifica indipendente.

Interpretazione e applicazione dei dati tossicologici

• Determinazione del NOAEL/LOAEL:

  Sulla base dei risultati degli studi tossicologici, è necessario identificare il livello senza effetti avversi osservabili (NOAEL) o il livello minimo con effetti avversi osservabili (LOAEL) per la sostanza notificata. Il NOAEL derivato dalla specie più sensibile e dall’endpoint più sensibile dovrebbe essere selezionato come punto di partenza per la valutazione della sicurezza.

• Applicazione dei fattori di sicurezza:

  Il fattore di sicurezza è un rapporto adimensionale applicato al NOAEL per derivare una dose giornaliera accettabile (ADI) o un livello di assunzione sicuro. Un fattore di sicurezza superiore a 100 è generalmente considerato accettabile. Questo fattore di sicurezza di 100 volte è una regola empirica consolidata in tossicologia, comunemente nota come «fattore d’incertezza». Viene tipicamente derivato dal prodotto di due fattori di 10 volte: possono essere applicati fattori aggiuntivi (ad es., 10× ciascuno) per l’estrapolazione da studi subcronici a cronici o quando si utilizza il LOAEL invece del NOAEL. Tutte le scelte relative ai fattori di sicurezza devono essere scientificamente giustificate.

• Un fattore di 10 volte per tenere conto delle differenze interspecifiche (variazioni tossicocinetiche e tossicodinamiche tra animali da laboratorio ed esseri umani).

• Un fattore di 10 volte per tenere conto delle differenze interindividuali (variazioni della sensibilità tra i diversi individui della popolazione umana).

• Confronto con le stime dell’esposizione alimentare:

  Il livello di assunzione sicuro derivato (ad es., ADI) dovrebbe essere confrontato con l’assunzione giornaliera stimata (EDI) derivata dalla valutazione dell’esposizione alimentare. Se l’EDI è sostanzialmente inferiore al livello di assunzione sicuro, si può concludere che la sostanza notificata è sicura nelle condizioni d’uso previste.

• Conclusione integrata sulla sicurezza:

  Dopo aver integrato tutti i dati tossicologici disponibili, le informazioni metaboliche e i risultati della valutazione dell’esposizione, dovrebbe essere elaborata una conclusione definitiva sulla sicurezza. La conclusione dovrebbe essere presentata in modo conciso e chiaro, riconoscendo esplicitamente eventuali rischi potenziali, lacune nei dati o aspetti che potrebbero richiedere ulteriore attenzione o monitoraggio.

Gli studi tossicologici chiave condotti dai richiedenti devono essere conformi agli standard GLP e OECD?

Sebbene il quadro FDA GRAS si basi fondamentalmente sul concetto di «riconoscimento generale» anziché su un obbligo normativo prescrittivo, è importante osservare che la U.S. FDA non impone un requisito normativo rigoroso secondo cui gli studi tossicologici presentati a supporto di una notifica GRAS debbano essere condotti nel pieno rispetto delle GLP o delle linee guida per i test OECD. Nella pratica, tuttavia, l’adesione a tali standard è fortemente raccomandata ed è diventata pressoché essenziale per una presentazione efficace.

GLP rappresenta un sistema di qualità rigoroso progettato per garantire che gli studi di sicurezza non clinici, compresi i test tossicologici, siano pianificati, eseguiti, monitorati, registrati, riportati e archiviati in modo da garantirne l’affidabilità, l’integrità e la credibilità. I dati generati da studi che non seguono gli standard GLP possono essere sottoposti a un esame normativo approfondito a causa di diverse carenze, tra cui: (i) l’assenza di un protocollo di studio dettagliato, con conseguenti dubbi metodologici; (ii) documentazione e conservazione inadeguate dei dati grezzi, con conseguente incompletezza dei dataset; e (iii) l’assenza di un’unità indipendente di assicurazione della qualità incaricata di supervisionare lo svolgimento dello studio, che compromette la credibilità dei risultati.

Le Linee guida OECD per i test sulle sostanze chimiche costituiscono un insieme di metodi di prova standardizzati e riconosciuti a livello internazionale per valutare i potenziali pericoli delle sostanze chimiche per la salute umana e l’ambiente. Queste linee guida rappresentano lo standard internazionale di riferimento per i test tossicologici, con una rigorosa convalida scientifica del disegno dello studio, del numero di animali, degli endpoint di osservazione e delle metodologie di analisi dei dati. Gli studi condotti in conformità alle linee guida OECD garantiscono rigore scientifico e comparabilità dei risultati, e i dati generati sono reciprocamente accettabili in tutti i Paesi membri dell’OECD, riducendo significativamente i costi e i tempi associati alla ripetizione non necessaria dei test.

Di conseguenza, affinché i dati tossicologici possano superare l’esame di esperti indipendenti e della FDA, i rapporti di studio presentati per dimostrare la sicurezza di una sostanza includono generalmente una dichiarazione di conformità alle GLP. Il documento ufficiale di orientamento della FDA, il Redbook, stabilisce esplicitamente che i rapporti tossicologici presentati a supporto delle domande relative agli additivi alimentari e delle notifiche GRAS dovrebbero includere una dichiarazione di conformità alle GLP. Inoltre, per garantire la qualità, la credibilità e l’applicabilità globale dei dati degli studi, la maggior parte dei richiedenti sceglie di condurre i propri studi tossicologici in conformità alle linee guida OECD.

Considerazioni chiave per la preparazione della sezione tossicologica

• Redazione chiara e concisa – Evitare l’accumulo indiscriminato di dati: Utilizzare una terminologia tossicologica precisa e tecnicamente accurata, evitando espressioni vaghe o fuorvianti. Il rapporto non dovrebbe limitarsi a essere una raccolta di studi tossicologici; i dati dovrebbero invece essere organizzati logicamente e sottoposti ad analisi approfondita e discussione critica.

• Qualità e attualità dei dati – Dare priorità ai dati aggiornati e pertinenti: Dovrebbero essere preferiti gli studi di elevata qualità e affidabilità. Eventuali studi con limitazioni metodologiche o incoerenze dovrebbero essere identificati, spiegati e discussi nel contesto del database complessivo. Prima di presentare il dossier GRAS, è essenziale assicurarsi che tutti i dati citati siano i più aggiornati e pertinenti e rappresentino adeguatamente la sostanza e le condizioni d’uso previste.

• Considerazione delle sottopopolazioni sensibili: Se è probabile che la sostanza venga consumata da popolazioni sensibili, quali neonati, bambini piccoli, donne in gravidanza, anziani o persone affette da specifiche condizioni mediche, è necessario prestare particolare attenzione alla sicurezza di tali gruppi.

Aderendo alle considerazioni sopra delineate, i richiedenti possono migliorare sostanzialmente la qualità e la capacità persuasiva della sezione tossicologica del dossier GRAS, fornendo così una solida base scientifica per la conclusione che la sostanza è GRAS nelle condizioni d’uso previste.

Come ottenere lo status GRAS?

In linea di principio, qualsiasi individuo o organizzazione può richiedere una determinazione GRAS per una sostanza attraverso uno dei due seguenti percorsi:

• GRAS autoaffermato: Questo percorso prevede la convocazione di un gruppo di esperti qualificati incaricato di valutare i dati disponibili sulla sicurezza e concludere che la sostanza è GRAS nelle condizioni d’uso previste. La determinazione GRAS risultante viene documentata in un dossier GRAS autoaffermato, che non viene presentato alla FDA e rimane riservato al notificante.

• GRAS notificato alla FDA: Questo percorso prevede la preparazione di un dossier GRAS completo, che viene quindi presentato alla FDA per una revisione formale. La FDA valuta la presentazione e invia una risposta, generalmente sotto forma di una lettera in cui dichiara di non avere ulteriori domande, se l’agenzia concorda con la determinazione GRAS.

Va osservato che una notifica GRAS alla FDA incorpora generalmente le conclusioni e i pareri degli esperti del gruppo di esperti qualificati originariamente elaborati per la determinazione GRAS autoaffermata.